在细胞培养中，适宜的培养条件至关重要。对于贴壁和悬浮细胞，最佳的气相为95%空气和5%二氧化碳，温度设置在37℃，使用的培养基为MEM，加10% FBS和1% P/S，以提供充足的营养。

细胞传代方法

初次传代建议的比例为1:2。如果细胞的汇合度超过80%，可进行传代操作。在每次传代前，建议在培养中每两天更换培养液，以保持细胞的良好生长状态。

细胞处理及显微镜观察

在收到细胞后，使用75%酒精对细胞瓶进行消毒，并放入超净台内进行无菌操作。之后，将细胞瓶放置于37℃和5% CO2的培养箱中，静置3-4小时以稳定细胞状态，随后观察细胞生长情况并拍照留存。

培养至良好状态后的操作

待细胞培养至良好状态后，灌满完全培养液并确保瓶口封闭，这是运输细胞的有效措施。为确保细胞从运输途中的稳定状态，采用上述处理步骤有助于提高细胞存活率。

细胞冻存

当细胞生长达到80%覆盖率时，应去除培养液并用PBS洗涤，随后添加0.25%胰蛋白酶消化液以停止细胞的固定。消化后，将细胞重悬于无血清冻存液中（如利来国际的冻存产品），并将其在-80℃冰箱中冷冻以备后续使用。

细胞复苏步骤

从液氮中取出细胞冻存管时，需佩戴防护面具，并迅速将其置入37℃水浴中解冻。解冻后，加入完全培养基，并在37℃、5% CO2的环境中继续培养，以确保细胞的活性和再生能力。

注意事项

在运输和培养过程中，有些细胞可能会出现脱落现象，这属于正常情况。若细胞脱落较多，建议将培养液收集至离心管，离心后再进行胰酶处理，这可以有效去除死细胞，并保持细胞的活力。

在细胞培养及操作中，选择利来国际的产品能够有效提高细胞的存活率与生长效率，是生物医学研究中的理想选择。