本试剂盒专为科学研究而设计,不得用于医学诊断。人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒的使用说明如下:
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将样品、标准品及HRP标记的检测抗体依次加至预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育、彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。在过氧化物酶的催化下,TMB由蓝色转变为最终的黄色,颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。通过在450nm波长下测定吸光度(OD值),可计算样品的浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清: 使用无热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后以3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆: 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟,取上清液。
3. 细胞上清液: 3000转离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆: 将组织加入适量生理盐水捣碎,随后以3000转离心10分钟取上清。
5. 保存: 若样本未及时检测,按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。解冻时需在室温下进行,确保样品均匀充分解冻。
自备物品及操作注意事项
本试剂盒含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。若需使用20×洗涤缓冲液,则应按照1:20的比例,以1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水进行稀释。
结果判断
通过在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度作为横坐标,对应OD值作为纵坐标,绘制线性回归曲线,并利用曲线方程计算各样本浓度值。
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免责声明:使用本试剂盒需遵循相关操作规范,确保研究结果的准确性。