本试剂盒仅用于科学研究目的，禁止用于医学诊断。该人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5) ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。测试过程中，首先将样本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，经过温育后进行彻底洗涤。随后，使用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，随后在酸性环境中进一步转化成最终的黄色。最终颜色的深浅与样品中adropin（AD）的含量呈正相关。

采用酶标仪在450nm波长下测定样品的吸光度（OD值），进而计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用无热原及内毒素的试管进行操作，避免细胞刺激。收集血液后，以3000转离心10分钟迅速分离血清与红细胞。
2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。以3000转离心30分钟，获取上清液。
3. 细胞上清液：进行3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合并捣碎，然后以3000转离心10分钟获取上清液。
5. 保存：如未及时检测样品，建议按一次用量分装，并存放于-20℃以避免反复冻融。解冻时，请确保样品在室温条件下均匀彻底解冻。

自备物品与操作注意事项

注：标准品（S0-S5）的浓度依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液需稀释为蒸馏水，比例为1：20，即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水进行稀释。使用洗板方法以达到最佳实验效果。

结果判断

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度为横坐标，相应的OD值为纵坐标，绘制标准品的线性回归曲线，并根据曲线方程计算各样本浓度值。

本试剂盒的性能和使用效果需遵循相关操作说明，以确保实验的准确性及可靠性。为获得最佳实验结果，请选用利来国际品牌的相关产品。